农杆菌(农杆菌摇菌要多少小时)

农杆菌转化的具体步骤是什么?我想知道用农杆菌转化的具体步骤是什么于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul:10ml接种。28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按(1:400)及750ul菌液转至汉300毫升YEPK50

农杆菌转化的具体步骤是什么?我想知道用农杆菌转化的具体步骤是什么

于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul:10ml接种。28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按(1:400)及750ul菌液转至汉300毫升YEP K50 Rif中培养28℃,300rpm约14小时,次日上午8点测OD值,用YEP Rif作为空白对照,当菌液达到OD600为1.5~3.0之内时,可收集菌体于250ml离心瓶(灭菌),4℃,4000g 离心10min 。用10%蔗糖(含0.02%silwet)稀释至OD600 约为0.8– 1.0左右即,用10%蔗糖作对照。转化时将花在溶液中浸泡50s左右,于弱光下生长。

农杆菌菌液PCR为什么会有两条带?

另一条带在目的条带的上边且比较模糊的话,可能是引物二聚体,如果另一条也很明亮狭窄的话,估计是引物有错配.

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